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NBA-Glo™荧光素酶支原体检测试剂盒

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L6001 10 T 询价
L6002 25 T 询价
L6003 50 T 询价
产品描述

NBA-GloTM  荧光素酶支原体检测试剂盒用于定检测细胞培养的支原体污染95% 以上的细胞培养中的支原体污染是由Mycoplasma fermentansM. orale M. pirum M. hyorhinis M. hominis,, M. salivariu M. arginine Acholeplasma laidlawii支原体所导致。活支原体产生真核细胞不表达的激酶,这些激酶可以将ADP转化为ATP。NBA-GloTM  荧光素酶支原体检测试剂盒通过提供支原体激酶所需的ADP和其他底物将ADP转化为ATP,并通过荧光素酶发光法检测转化的ATP来确认细胞培养中是否有活支原体污染。该试剂盒能够快速检测包括以上八种和其他多种常见活支原体

产品特性

·灵敏度

NBA-GloTM  荧光素酶支原体检测试剂盒灵敏度和巢式PCR法检测支原体的灵敏度相当。

 

·便捷的实验步骤,方便常规监测细胞培养的支原体污染

实验步骤简单,易于操作,在30min内获得实验结果。

 

·活支原体污染检测特别适合于连续监测细胞去除支原体污染的效果

去除支原体污染后残存的支原体DNA会干扰巢式PCR法和qPCR法检测支原体,给出假阳性的结果。NBA-GloTM  荧光素酶支原体检测试剂盒通过检测活支原体避免了类似的假阳性。

实验步骤

1. 待测细胞培养基样品准备

1) 从对数生长期的细胞培养中取1mL细胞培养基。

2) 细胞培养基室温离心 200g 5分钟。将大约800μL培养基转到新的微管中,注意不要带入离下的细胞碎片。

3) 用以上准备的细胞培养基进行荧光素酶支原体检测。

2. 荧光素酶支原体检测

1) 50μL细胞培养基样品加入96孔白色不透明细胞板。

2) 将荧光素酶支原体检测试剂和底物平衡到室温22℃-25℃),轻摇混匀。

3) 加入50μL荧光素酶支原体检测试剂到50μL细胞培养基样品。

4) 振荡混匀10sec,室温孵育5min,读取荧光值(读数1)。

5) 加入10μL荧光素酶支原体检测底物。

6) 振荡混匀10sec,室温孵育10min, 读取荧光值(读数2)。

 

3. 结果

读数2和读数1的比值用来判断是否存在支原体污染。

读数2和读数1的比值

结果解释和建议

< 1

无支原体污染

1-1.2

可能的支原体污染。隔离细胞,培养24-48hr后再次检测。

 

> 1.2

支原体污染

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