NBA-GloTM 荧光素酶支原体检测试剂盒用于定性检测细胞培养中的支原体污染。95% 以上的细胞培养中的支原体污染是由Mycoplasma fermentans，M. orale， M. pirum， M. hyorhinis， M. hominis,， M. salivariu， M. arginine 和Acholeplasma laidlawii支原体所导致。活支原体产生真核细胞不表达的激酶，这些激酶可以将ADP转化为ATP。NBA-GloTM 荧光素酶支原体检测试剂盒通过提供支原体激酶所需的ADP和其他底物将ADP转化为ATP，并通过荧光素酶发光法检测转化的ATP来确认细胞培养中是否有活支原体污染。该试剂盒能够快速检测包括以上八种和其他多种常见活支原体。
·高灵敏度
NBA-GloTM 荧光素酶支原体检测试剂盒灵敏度和巢式PCR法检测支原体的灵敏度相当。
·便捷的实验步骤，方便常规监测细胞培养的支原体污染
实验步骤简单，易于操作，在30min内获得实验结果。
·活支原体污染检测特别适合于连续监测细胞去除支原体污染的效果
去除支原体污染后残存的支原体DNA会干扰巢式PCR法和qPCR法检测支原体，给出假阳性的结果。NBA-GloTM 荧光素酶支原体检测试剂盒通过检测活支原体避免了类似的假阳性。
1. 待测细胞培养基样品准备
1) 从对数生长期的细胞培养中取1mL细胞培养基。
2) 细胞培养基室温离心 200g ，5分钟。将大约800μL培养基转到新的微管中，注意不要带入离下的细胞碎片。
3) 用以上准备的细胞培养基进行荧光素酶支原体检测。
2. 荧光素酶支原体检测
1) 取50μL细胞培养基样品加入96孔白色不透明细胞板。
2) 将荧光素酶支原体检测试剂和底物平衡到室温（22℃-25℃），轻摇混匀。
3) 加入50μL荧光素酶支原体检测试剂到50μL细胞培养基样品。
4) 振荡混匀10sec，室温孵育5min，读取荧光值（读数1）。
5) 加入10μL荧光素酶支原体检测底物。
6) 振荡混匀10sec，室温孵育10min, 读取荧光值（读数2）。
3. 结果
读数2和读数1的比值用来判断是否存在支原体污染。
读数2和读数1的比值
结果解释和建议
< 1
无支原体污染
1-1.2
可能的支原体污染。隔离细胞，培养24-48hr后再次检测。
> 1.2
支原体污染
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