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NBA-Glo™双荧光素酶检测试剂盒

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目录号 规格 价格
L1301 10 ml 询价
L1302 100 ml 询价
L1303 10x100 ml 询价
产品描述

双荧光素酶报告基因在哺乳动物细胞功能的研究方面具有广泛的应用,包括细胞代谢,信号通路,转录因子,基因功能,药物筛选等。在双荧光素酶报告系统中,一个荧光素酶作为实验报告基因,用于指示所研究的靶标;另一个荧光素酶作为对照报告基因,用于标化实验报告基因的活性,从而最大限度地减少因为转染效率、细胞数量、细胞裂解的效果、加样体积等导致的实验误差。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒由宁波友波生物科技有限公司所开发,具有灵敏度高、稳定性好、重复性好、使用便捷等优点,综合性能超过国外同类产品。在同一个样品中,先加入R1试剂检测萤火虫荧光素酶的活性,然后立即加入R2 试剂,在淬灭萤火虫荧光素酶的同时检测海肾荧光素酶的活性,整个过程在几十秒内完成一个样品的检测。如果用多孔板进行检测,则所需的实验时间更短。在数据分析时,通过计算实验荧光素酶和对照荧光素酶相对荧光强度的比值来标化实验结果。

产品特性

·高稳定性

产品-20℃或以下储存3个月,-80℃或以下储存12个月荧光素酶保持 > 90%的活性。

·高信号强度

HEK293细胞在60%左右的细胞密度的情况下转染双质粒,48小时后检测双荧光信号读值均达到百万级。

·使用便捷

R2试剂直接灭活萤火虫荧光素酶的活性,同时启动海肾荧光素酶活性反应,在保证后者反应信号的同时,对萤火虫荧光素酶灭活程度超过99%

· 适合于高通量检测

荧光信号半衰期较长,相对荧光强度保持稳定的线性关系,满足一次同时进行大批量的微孔板实验需求。

实验步骤

1. 96孔或384孔细胞培养板铺合适密度的待检测细胞,转染合适质粒或带有相关双荧光素酶表达载体的稳定细胞株。建议使用白板。

2. 根据项目需求对细胞进行相关处理,并继续培养合适的时间。

3. 取出检测缓冲液及底物,在室温平衡20分钟。

4. 取出待测细胞培养板,在室温平衡20分钟

5. 准备检测试剂,R1试剂可以直接使用。R2底物为100x 浓缩液,使用前用R2缓冲液配成R2 1x工作液。注意避光。

6. R1试剂的用量是实际细胞培养液体积的1/2,加完后轻轻振荡2分钟,放置暗处继续裂解58分钟。

7. luminescence读板仪上读取荧光信号。此为萤火虫荧光素酶活性读数。保存数据。

8. R2试剂的用量是原培养孔实际细胞培养液体积的等体积,加完成轻轻振荡2分

9. luminescence读板仪上读取荧光信号。此为海肾荧光素酶活性读数。保存数据。

10. 进行数据处理分析。

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