荧光素酶报告基因系统(Luciferase-based reporter gene system)被广泛应用于细胞内信号通路、转录因子调节、受体功能研究、高通量药物筛选等。胞内荧光素酶的表达能够定量进行检测,其工作原理是荧光素酶在底物荧光素(Luciferin)、ATP和分子氧的存在下,能将荧光素氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),从而产生自发的冷光,在过量的荧光素和ATP存在时,发光的强度与荧光素酶的量成正相关。
友波生物利用专有的技术成功开发出NBA-GloTM稳定型荧光素酶检测试剂盒。该试剂盒为均质即用型(Homogeneous ready for use)试剂,集细胞裂解、荧光素酶检测于一体,通过“加入-混合-检测”免去了先裂解后检测的实验步骤,而且稳定的“辉光”更适合高通量样品的检测。
·高稳定性
储存试剂于-20℃ 3个月,-80℃ 12个月,试剂保持 > 90%的灵敏度;稳定的“辉光”信号半衰期超过4小时。
·高灵敏度
能检测出100个荧光素酶表达细胞。
·宽动态量程
4个数量级的动态量程范围内维持稳定的线性关系。
·便捷的实验步骤
“加入-混合-检测”使整个实验步骤更为简单,更易操作。
·适合于高通量检测
荧光信号半衰期超过2小时,相对荧光强度保持稳定的线性关系,满足一次同时进行大批量的微孔板实验需求。
1. 实验前将NBA-GloTM稳定型荧光素酶检测试剂平衡至室温,轻摇混匀。
2. 将待测细胞板(白色透底或黑色透底板)在室温平衡10分钟。
3. 加入与细胞培养液等体积的检测试剂到各培养反应孔。
4. 在振板机上振荡1分钟,将样品板在室温避光孵育5~8分钟。
5. 在luminescence读板仪上读取并记录荧光信号。
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