三磷酸腺苷(ATP)是生物体内的重要能量来源,ATP在活细胞内的含量与细胞的数量成正比。这一特性被应用于定量活细胞的的细胞数量,其中基于荧光素酶(Luciferase)的冷光细胞活力检测系统以其高灵敏度、高稳定性被广泛用于各种活细胞的检测及药物筛选。荧光素酶在底物荧光素(Luciferin)、ATP和分子氧的存在下,能将荧光素氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),从而产生自发的冷光,发光的强度与ATP的量成正相关,从而与活细胞数成正比。
公司利用专有的技术成功开发出NBA-GloTM细胞活力检测试剂盒。该试剂盒为均质即用型(Homogeneous ready-to-use)试剂,集细胞裂解、荧光素酶、荧光素于一体,通过“加入-混合-检测”免去了先裂解后检测的实验步骤,而且稳定的“辉光”更适合各种肿瘤细胞的增殖检测和药物细胞毒高通量筛选的应用。
·高稳定性
室温(22-25℃)储存48小时,4℃储存1周,-20℃储存3个月,-80℃或以下储存12个月荧光素酶保持 > 90%的活性。
·高灵敏度
在96孔板中能检测出少于100个细胞/孔的细胞数量。
·宽动态量程
4个数量级的动态量程范围内维持稳定的线性关系。
·便捷的实验步骤
“加入-混合-检测”使整个实验步骤更为简单,更易操作。
·适合于高通量检测
荧光信号半衰期超过2小时,相对荧光强度保持稳定的线性关系,满足一次同时进行大批量的微孔板实验需求。
1) 取出NBA-GloTM细胞活力检测试剂,在室温平衡20分钟。轻摇混匀。
2) 取出待测细胞培养板,在室温平衡20分钟。
3) 加50 µl 的检测试剂到 100 µl 96孔板细胞中, 或10 µl 试剂到20 µl 384 孔板细胞中,轻轻振荡10秒分钟,放置暗处继续裂解10分钟。
4) 在luminescence读板仪上读取荧光信号。
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